怎样提取植物中的蛋白质？
植物蛋白质提取方法总汇
一、植物组织蛋白质提取方法
1、根据样品重量（1g样品加入3.5ml提取液，可根据材料不同适当加入），准备提取液放在冰上。
2、把样品放在研钵中用液氮研磨，研磨后加入提取液中在冰上静置（3-4小时）。
3、用离心机离心8000rpm40min4℃或11100rpm20min4℃
4、提取上清液，样品制备完成。
蛋白质提取液：300ml
1、1Mtris-HCl（PH8） 45ml
2、甘油（Glycerol）75ml
3、聚乙烯吡咯烷酮（Polyvinylpolypyrrordone）6g
这种方法针对SDS-PAGE，垂直板电泳！
二、植物组织蛋白质提取方法
氯醋酸—丙酮沉淀法
1、在液氮中研磨叶片
2、加入样品体积3倍的提取液在-20℃的条件下过夜，然后离心（4℃8000rpm以上1小时）弃上清。
3、加入等体积的冰浴丙酮（含0.07%的β-巯基乙醇），摇匀后离心（4℃8000rpm以上1小时），然后真空干燥沉淀，备用。
4、上样前加入裂解液，室温放置30分钟，使蛋白充分溶于裂解液中，然后离心（15℃8000rpm以上1小时或更长时间以没有沉淀为标准），可临时保存在4℃待用。
5、用Brandford法定量蛋白，然后可分装放入-80℃备用。
药品：提取液：含10%TCA和0.07%的β-巯基乙醇的丙酮。裂解液：2.7g尿素0.2gCHAPS溶于3ml灭菌的去离子水中（终体积为5ml），使用前再加入1M的DTT65ul/ml。
这种方法针对双向电泳，杂质少，离子浓度小的特点！当然单向电泳也同样适用，只是电泳的条带会减少！
三、组织：肠黏膜
目的：WESTERN BLOT检测凋亡相关蛋白的表达
应用TRIPURE提取蛋白质步骤：
含蛋白质上清液中加入异丙醇：（1.5ml每1mlTRIPURE用量）
倒转混匀，置室温10min
离心：12000 g，10min，4度，弃上清
加入0.3M盐酸胍/95％乙醇：（2ml每1mlTRIPURE用量）
振荡，置室温20min
离心： 7500g，5 min，4度，弃上清
重复0.3M盐酸胍/95％乙醇步2次
沉淀中加入100％乙醇 2ml
充分振荡混匀，置室温20 min
离心： 7500g，5min，4度，弃上清吹干沉淀
1％SDS溶解沉淀
离心：10000g，10min，4度
取上清-20度保存（或可直接用于WESTERN BLOT）
存在的问题：加入1％SDS后沉淀不溶解，还是很大的一块，4度离心后又多了白色沉定，SDS结晶？测浓度，含量才1mg/ml左右。
解决：提蛋白试剂盒，另外组织大小适中，要碎，立即加2X BUFFER，然后煮5－10分钟，效果很好的。
四、植物材料：水稻苗，叶鞘，根
1、200毫克样品置于冰上磨碎
2、加lysis buffer，离心，10000rpm，4度，5min取上清
3、重复离心5min
lysis buffer：urea np-40 ampholine 2-me pvp-40
五、蛋白质样品制备
秧苗蛋白质样品的提取按Davermal等（1986）的方法进行。
100mg材料剪碎后加入10mgPVP-40(聚乙烯吡咯烷酮)及少量石英砂，用液氮研磨成粉，加入1.5 ml 10% 三氯乙酸（丙酮配制，含10mM即0.07%β-巯基乙醇），混匀，-20℃沉淀1小时，4℃，15000 r/min离心15 min，弃上清，沉淀复溶于1.5ml冷丙酮(含10 mMβ-巯基乙醇)，再于-20℃沉淀1小时，同上离心弃上清，（有必要再用80％丙酮(含10 mMβ-巯基乙醇所得沉淀低温冷冻真空抽干。
按每mg干粉加入20μl（可调） UKS液[9.5 M尿素，5mM碳酸钾，1.25%SDS，0.5%DTT(二硫苏糖醇)，2% Ampholine (Amersham Pharmacia Biotech Inc，pH3.5-10)，6% Triton X-100]，37℃温育30min，期间搅动几次，28度 （温度低，高浓度的尿素会让溶液结冰）16000 r/min离心15 min，离心力越大时间长一点越好！上清即可上样电泳。或者-70度保存
六、植物根中蛋白质的抽取
(1) sample, 液氮研磨
(2) 装1.5 ml centrifuge 用tube
(3) 加 1M KH2PO4 K2HPO4 700 ul
(4) 12000 rpm, 4度, 10-15minite
(5) 取上层液，蛋白质就在里面
要想从小麦叶片中提取蛋白质怎样进行预处理
植物叶蛋白的提取主要有盐析法、有机溶剂沉淀法、加热法(含逐步和快速加热)、
离心分离法、结晶和重结晶法等。依据今后的开发方向(以饲料为基础，以食品、饮品为开发方向)及简便易行和使用的原则，主要采用盐析法、加热法和有机溶剂法分离提取叶蛋白(冷提和热提)。不同的提取方法，对样品的处理方式、程度和要求不同，结果也有差异。
(一)(NH4)2SO4
沉淀法提取叶蛋白
取0.3g
植物叶蛋白，用液氮充分研磨转入离心管中，加入3mL
提取缓冲液，摇匀并放在4℃条件下提取1h，充分溶解蛋白后，4℃10000r/min
离心20min，弃沉淀，上清液中加入(NH4)2SO4
，混匀1h，按1：2(v/v)加入-20℃预冷的80%丙酮，混匀后4℃12000r/min
离心10min，沉淀在-20℃冰箱中放置20min，使丙酮完全挥发后加适量上样缓冲液，待沉淀充分溶解后，4℃12000r/min
离心5min，取上清液即为所提取的叶蛋白溶液。
(二)改良丙酮沉淀法提取叶蛋白
取0.3g
左右的植物叶片，用液氮研磨，色素多的可按材料鲜重的10%加入PVP，并将充分研磨过的样品转入离心管中，加入4mL
的提取缓冲液，摇匀并放在4℃条件下提取1h，充分溶解蛋白。放置后的样品充分摇匀，4℃10000r/min
离心30min，弃沉淀，上清液中加入2.5～3倍体积的村-20℃条件下过夜，让蛋白充分沉淀。之后，4℃10000r/min
离心30min，其上清，沉淀置于-20℃下，使丙酮完全挥发，如有必要加入上样缓冲液溶解沉淀。缓冲液用量300ul，沉淀充分溶解后，转移至1.5mL
离心管中，4℃12000r/min
离心15min
，取上清液即为所提取的叶蛋白溶液。
该方法提取的蛋白质，提取效率高，杂质干扰少，电泳结果蛋白条带清晰，数量多。
(三)植物叶片总蛋白的提取—三氯醋酸—丙酮沉淀法
①在液氮中研磨适量的叶片；
②悬浮于含10%的三氯醋酸和含0.07%β-巯基乙醇(可用DTT
代替)的丙酮溶液在-20℃条件下冰浴；
③让蛋白质沉淀过夜后离心(4℃
10000r/min
离心30~60min)，弃上清；
④重悬沉淀浮于含0.07%β-巯基乙醇的预冷丙酮溶液中；
⑤离心(同上)后真空干燥沉淀；
⑥用上样缓冲液溶解沉淀，离心；
⑦Brandford
法定量蛋白，然后分装至Eppendof
管中保存在-78℃备用。
(四)分步提取可溶性叶蛋白
(1)蛋白质浸出
①水溶性蛋白质浸出：用0.05molpH7.0的磷酸缓冲液(或蒸馏水)将样品制成匀浆液，然后离心15min(4000r/min)，收集上清液即蛋白质浸出液，再将沉淀物按上述操作重复两次。②盐溶性蛋白质浸出用10％NaCl
将前者剩余沉淀物分离提取两次，收集蛋白质浸出液。
(2)蛋白质沉淀用0.1mol
醋酸将蛋白质浸出液pH
值调至蛋白质等电点(pH4.5左右)，即8体积蛋白质浸出液加入1体积0.1mol
醋酸，混匀，离心15min(3000r/min)，弃去上清液，沉淀物即为可溶性叶蛋白。
(3)蛋白质收集于沉淀物中加入95％乙醇，混匀，用定量滤纸过滤或抽滤，待风干后收集。
从植物提取液中去除蛋白质的方法?
看了楼上的 ,应该就是这三种方法了.一,过滤,洗脱,由于蛋白质是大分子物质,利用滤膜孔径(过滤法)的不同,或者柱子(色谱法)内填充料的不同, 可以把蛋白质过滤或者洗脱出来.二.萃取.由于蛋白质可溶于一些有机溶剂,可以将其混匀之后静置用分液漏斗分液三.加蛋白酶加水解蛋白酶,直接可以把蛋白质水解,达到去除的目的.
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